玉米光敏色素A1基因(ZmPHYA1)在棉花中的转化及分子鉴定 作物学报    2021, 47 (6): 1197-1202.   DOI: 10.3724/SP.J.1006.2021.03037

图1 外源ZmPHYA1 基因的棉花转化与再生植株的草铵膦抗性基因检测
A: 农杆菌侵染后的愈伤筛选及诱导; B: 愈伤诱导增殖; C: 胚型愈伤分化形成的体细胞胚胎; D: 再生的幼苗; E: 再生的嫁接植株; F: 部分再生株草铵膦抗性基因的检测, 其中1、2、4分别为株系Line 9、Line 14和Line 41, 3为非转基因的再生株, “-”为受体对照, “+”为质粒阳性扩增, M: DNA marker。

正文中引用本图/表的段落

将浸染后的茎段在含有草铵膦筛选的诱导培养基上进行诱导并形成愈伤, 持续诱导分化形成块状愈伤(图1-A, B)。持续诱导形成胚性愈伤后, 部分发育可得到体细胞胚(图1-C), 挑选胚状体转接诱导分化形成再生植株(图1-D)。再生株持续生长一段时间后, 将其嫁接到预先种植的健壮棉花幼苗砧木上, 成活后移入花盆中种植(图1-E)。提取具有草铵膦抗性的候选再生株系的DNA, 扩增草铵膦抗性基因。PCR电泳结果表明, 草铵膦抗性基因目标条带大小为256 bp, 表明抗性植株中该草铵膦抗性基因成功整合到转基因植株中(图1-F)。

A: 转基因株系的株高表型, 标尺为10 cm; B依次为WT、#9 (Line 9), #14 (Line 14), #41 (Line 41)株系纤维长度图, 标尺为1 cm; C、D、E和F分别为WT、#9 (Line 9)、#14 (Line 14)、#41 (Line 41)的株系平均株高、平均单铃籽棉重、衣分以及纤维长度。*表示P < 0.05差异显著。

本文的其它图/表

• 表1 转基因棉花植株中用于目标基因的检测引物
  
• 图2 转外源基因ZmPHYA1棉花草铵膦抗性株系的鉴定与PCR分子检测
  A, B: 抗除草剂检测的不同阳性植株后代; C: 分离的非抗性植株后代; D: 部分抗性植株的ZmPHYA1 基因的PCR检测, 其中“+”为质粒阳性扩增, 1和2为Line 9株系的不同后代单株, 3和4为Line 14株系的不同后代单株, 5和6为Line 41株系的不同后代单株。“-”为受体对照; M: DNA marker。
  
• 图3 不同棉花转基因株系中外源ZmPHYA1蛋白表达的免疫印迹检测
  M: 蛋白marker; WT: 转基因棉花受体R15; Isolated non-transgenic line: 转基因株系分离的非抗性株; #9、#14、#41分别为转外源ZmphyA1基因的不同株系Line 9、Line 14和Line 41。“+”为检测中利用转玉米中同源基因ZmPHYA2 (3393 bp)的阳性棉花植株。
  
• 图4 转基因植株不同农艺性状的分析比较
  A: 转基因株系的株高表型, 标尺为10 cm; B依次为WT、#9 (Line 9), #14 (Line 14), #41 (Line 41)株系纤维长度图, 标尺为1 cm; C、D、E和F分别为WT、#9 (Line 9)、#14 (Line 14)、#41 (Line 41)的株系平均株高、平均单铃籽棉重、衣分以及纤维长度。^*表示P < 0.05差异显著。