作物学报 ›› 2008, Vol. 34 ›› Issue (06): 934-943.doi: 10.3724/SP.J.1006.2008.00934
高启国1;宋明1;牛义1;杨昆2;朱利泉2,*;王小佳1,*
GAO Qi-Guo1,SONG Ming1,NIU Yi1,YANG Kun2,ZHU Li-Quan2*,WANG Xiao-Jia1*
摘要: 在甘蓝自交不亲和信号传导中SRK和THL1之间可能存在相互作用。为进一步证实该相互作用, 以甘蓝E1为材料, 采用RT-PCR技术扩增了THL1和SRK激酶结构域(记为SRKE1)编码序列, 构建了THL1原核表达质粒pET43.1-THL1, SRKE1原核表达质粒pET431-SRKE1和真核表达质粒pPIC9K-SRKE1, 分别在宿主菌大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中进行表达。THL1融合蛋白经胰岛素检测, 表明表达的THL1有氧化还原活性。建立了体外检测蛋白质相互作用的新方法, 并用该方法对THL1与SRKE1的相互作用进行了检测, 结果表明THL1可与SRKE1相互作用并形成稳定的复合体, 这为深入分析THL1与SRK相互作用机理提供了理论和技术基础。
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