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水稻OsCNGC10基因抗倒伏性以及抗旱性功能研究
朱忠林, 文月, 周棋, 巫燕飞, 杜雪竹, 盛锋
作物学报    2024, 50 (5): 1351-1360.   DOI: 10.3724/SP.J.1006.2024.32027
摘要   (112 HTML13 PDF(pc) (9272KB)(130)  

环核苷酸门控离子通道是一种配体门控的阳离子通道, 存在于动物和植物体内, 是真核生物信号级联反应的重要组成部分。本研究利用水稻环核苷酸门控离子通道(cyclic nucleotide-gated channel, OsCNGC10)基因, 构建了超表达载体 pU1301-CNGC10-Flag和双靶点敲除载体pRGEB32-CRISPR/cas9-cngc10, 通过农杆菌介导的遗传转化法获得敲除和过表达材料, 并从T2代中分离到纯合植株oscngc10-2OE-CNGC10-6。转基因植株茎秆特性以及抗倒伏性分析表明, 突变体oscngc10-2茎秆强度和抗倒伏性增强; 茎秆细胞壁组织切片以及组织成分分析则表明突变体oscngc10-2植株抗倒伏性增强是由于茎秆细胞壁茎壁厚度、薄壁组织细胞丰度以及木质素含量增加所致; 过表达OsCNGC10降低了茎秆壁厚、茎秆木质素含量以及茎秆细胞壁细胞丰度, 敲除OsCNGC10增加了茎秆木质素含量且增加了茎秆细胞壁薄壁细胞丰度, 初步证明OsCNGC10与水稻茎秆细胞壁成分合成相关, 负调控水稻抗倒伏性; T2代田间试验结果表明, 与野生型相比, 突变体oscngc10-2植株的株高、有效穗、穗长、穗粒数、结实率、千粒重和单株产量等农艺性状显著提升; 苗期干旱胁迫实验结果表明, 在干旱胁迫下, OsCNGC10基因缺陷型植株体内丙二醛(MDA)含量积累速度加快, 且无法形成足够的游离脯氨酸, 而过表达OsCNGC10植株在遭受干旱胁迫时, 体内游离脯氨酸(Pro)含量大量升高, 且MDA积累速度相对变慢, 初步说明OsCNGC10正向调控水稻苗期抗旱性。本研究结果表明水稻OsCNGC10可能在水稻抗倒伏及抗旱方面有潜在功能, 为培育抗倒伏且高产的水稻新品种提供了理论基础和新的种质资源。



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图6 转基因植株与野生型(WT)组织切片显微镜观察
CWT: 茎壁厚度; SWT: 秆壁厚度。
正文中引用本图/表的段落
为进一步探究oscngc10-2株系茎秆抗倒伏能力的提升是否与细胞壁结构改变有关, 对同处于抽穗期的转基因材料取倒二节进行徒手切片观察。利用植物番红染绿进行染色, 在光学显微镜下成像, 并截取对应位置于体视镜下放大, 观察细胞壁厚(CWT)和秆壁厚度(SWT)。结果发现, oscngc10-2植株茎秆细胞壁的CWT和SWT均显著高于野生型WT, 而OE-CNGC10-6则为三者最低(图6)。因此推测, 敲除oscngc10-2引起细胞壁结构的改变, 细胞壁厚度和杆壁厚度增加, 导致了敲除oscngc10-2植株茎秆特性的改变从而提高了抗倒伏能力。
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