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基于转录组分析鉴定甘蓝型油菜开花候选基因以及BnaCOR27功能验证
王晨, 贺丹, 姚敏, 邱萍, 何昕, 熊兴华, 康雷, 刘忠松, 钱论文
作物学报    2025, 51 (10): 2693-2704.   DOI: 10.3724/SP.J.1006.2025.55008
摘要   (142 HTML23 PDF(pc) (8838KB)(53)  

开花是高等植物从营养生长到生殖生长的一个重要阶段, 影响生物量和种子产量。为了揭示甘蓝型油菜春化的调控网络以及挖掘重要候选基因, 本研究对7个甘蓝型油菜品种春化前后的叶片转录组数据进行分析, 鉴定出1305个差异表达基因, 其中上调基因有554个, 下调基因有751个。GO富集分析发现, 差异基因主要富集在春化途径、光周期途径、昼夜节律、花发育以及冷响应等生物学过程中, 进一步分析发现96个开花基因存在差异表达, 包括BnaVIN3BnaFLCBnaCOR27等基因。此外, 全基因组关联分析鉴定BnaCOR27-C04与开花时间显著关联, 结合加权基因共表达网络分析, 发现BnaCOR27BnaFLCBnaFTBnaVIN3等基因直接相连形成潜在的网络调控甘蓝型油菜开花时间。进一步利用CRISPR/CAS9基因编辑技术对BnaCOR27进行敲除, 通过对T3代转基因植株表型分析, 发现敲除突变体株系表现出早花表型。这一结果能对已有的甘蓝型油菜开花研究进行补充和丰富, 为进一步改良开花性状提供遗传基础。



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图4 显著相关区域候选基因的分析
A: 全基因组关联分析检测到单体型区域(16,048,376~16,594,153 bp)与开花期显著关联。红点表示BnaCOR27-C04中的SNP与开花期关联, 虚线表示显著性阈值; B: BnaCOR27-C04基因区域2个等位基因对应的表型分析。通过t检验分析等位基因座之间的差异。
正文中引用本图/表的段落
广泛收集157份甘蓝型油菜自交系, 这些材料具有丰富的遗传多样性, 为检测与开花期相关的遗传变异提供了良好的基础。本研究调查了多年多点的开花期表型数据, 结合高密度的SNP, 利用全基因组关联分析检测到一个单体型区域(16,048,376~ 16,594,153 bp)与开花期显著关联(图4-A)。进一步深入剖析该区域发现1个SNP位点位于BnaCOR27- C04基因的启动子区域, 与开花时间显著关联(图4-A)。启动子区域是基因表达调控的关键部位, 它能影响基因转录起始的频率和效率。位于BnaCOR27- C04基因启动子区域的SNP可能通过改变启动子与转录因子的结合能力, 进而影响BnaCOR27-C04基因的表达水平, 最终对油菜的开花时间产生影响。为了更直观地了解该SNP对开花时间的影响, 对比分析了这2个等位基因A和G所对应材料的开花表型。试验结果表明, 携带等位基因A的材料开花时间要显著早于携带G等位基因的材料(图4-B)。这一结果不仅进一步证实了BnaCOR27-C04基因启动子区域的SNP与开花时间之间存在相关性, 还有利于开发功能标记, 选育早熟油菜新品种。
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