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基于转录组分析鉴定甘蓝型油菜开花候选基因以及BnaCOR27功能验证
王晨, 贺丹, 姚敏, 邱萍, 何昕, 熊兴华, 康雷, 刘忠松, 钱论文
作物学报    2025, 51 (10): 2693-2704.   DOI: 10.3724/SP.J.1006.2025.55008
摘要   (142 HTML23 PDF(pc) (8838KB)(53)  

开花是高等植物从营养生长到生殖生长的一个重要阶段, 影响生物量和种子产量。为了揭示甘蓝型油菜春化的调控网络以及挖掘重要候选基因, 本研究对7个甘蓝型油菜品种春化前后的叶片转录组数据进行分析, 鉴定出1305个差异表达基因, 其中上调基因有554个, 下调基因有751个。GO富集分析发现, 差异基因主要富集在春化途径、光周期途径、昼夜节律、花发育以及冷响应等生物学过程中, 进一步分析发现96个开花基因存在差异表达, 包括BnaVIN3BnaFLCBnaCOR27等基因。此外, 全基因组关联分析鉴定BnaCOR27-C04与开花时间显著关联, 结合加权基因共表达网络分析, 发现BnaCOR27BnaFLCBnaFTBnaVIN3等基因直接相连形成潜在的网络调控甘蓝型油菜开花时间。进一步利用CRISPR/CAS9基因编辑技术对BnaCOR27进行敲除, 通过对T3代转基因植株表型分析, 发现敲除突变体株系表现出早花表型。这一结果能对已有的甘蓝型油菜开花研究进行补充和丰富, 为进一步改良开花性状提供遗传基础。



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图7 CAS:BnaCOR27-T3转基因植株转录组差异基因分析
A: CAS:BnaCOR27-T3转基因材料差异基因火山图; B: CAS:BnaCOR27-T3转基因材料GO富集分析; C: CAS:BnaCOR27-T3转基因材料转录组差异基因表达量分析。ZS6: 中双6号。
正文中引用本图/表的段落
对敲除突变植株和对照植株转录组差异基因进行统计分析, 一共检测到3370个差异基因, 其中上调基因有1013个, 下调基因有2357个, 表明基因敲除显著改变了CAS:BnaCOR27-T3叶片中的基因表达谱(图7-A)。CAS:BnaCOR27-T3敲除植株表现出早花表型, 因此我们对差异基因进行GO富集分析, 发现差异基因显著富集在对昼夜节律的调控、光周期途径以及花发育等方面(图7-B)。接下来我们将差异基因做表达量分析。结果表明, 开花途径中BnaSOC1-C03、BnaTOC1-C07、BnaTOC1-C09、BnaEFL2-A07、BnaEFL2-A02、BnaCIB1-C01、BnaPHYA-C08、BnaAGL19-C07均为开花促进基因, 它们在敲除突变植株中的表达量低于对照材料; 而BnaELF3-A04、BnaEMF1-A03为抑制开花基因, BnaSVP-A04通常对开花起到负调控作用, 这些基因在敲除突变植株中的表达量高于对照材料(图7-C)。通过对敲除突变植株转录组差异基因的全面分析, 揭示了BnaCOR27基因敲除后对甘蓝型油菜基因表达谱的广泛影响, 尤其是在昼夜节律调控、光周期途径和花发育等生物学过程中。这些结果为深入理解BnaCOR27基因在甘蓝型油菜开花调控中的作用机制提供了丰富的信息, 也为后续进一步研究开花调控网络和改良油菜开花性状奠定了坚实的基础。
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