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茶树己糖激酶基因CsHXK2的启动子克隆及表达特性分析
李娜娜, 刘莹, 张豪杰, 王璐, 郝心愿, 张伟富, 王玉春, 熊飞, 杨亚军, 王新超
作物学报    2020, 46 (10): 1628-1638.   DOI: 10.3724/SP.J.1006.2020.94166
摘要   (896 HTML19 PDF(pc) (21041KB)(529)  

植物己糖激酶是双功能蛋白, 具有磷酸化己糖和介导糖信号的关键性作用。前期研究中, 我们从茶树中克隆获得4个己糖激酶基因, 其中CsHXK2基因编码492个氨基酸残基, 与拟南芥AtHXK3、番茄LeHXK4归为Type A类HXKs。利用RT-PCR技术, 克隆获得长度为2029 bp的CsHXK2基因启动子。CsHXK2基因可能受到光照、低温、病原菌、糖和多种激素等信号的调控, 且可能特异性表达于叶、花、种子、根系、腋芽等组织。CsHXK2蛋白定位于叶绿体内。酵母突变体功能互补试验表明, 去除叶绿体转运信号肽的CsHXK2成熟蛋白具有葡萄糖和果糖磷酸化活性。茶树组织特异性表达分析显示, CsHXK2基因在根和茎中表达量最高, 而在老叶中表达量最低。CsHXK2基因的表达受低温胁迫而显著下调, 经炭疽菌侵染的茶树叶片内CsHXK2基因的表达也受到显著抑制, 而外源赤霉素(GA3)处理的茶树叶片内CsHXK2基因表达显著上调。本研究结果表明, CsHXK2基因在茶树的生长发育过程和逆境胁迫响应中发挥重要的调控作用。



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图1 茶树CsHXK2基因启动子扩增及序列
A: CsHXK2启动子PCR扩增产物电泳图; B: CsHXK2启动子序列。
正文中引用本图/表的段落
通过qRT-PCR扩增, 获得了特异性的目的条带(图1-A)。经克隆、测序得到CsHXK2基因起始密码子ATG上游-2097 bp至-69 bp启动子序列(图1-B), 其中腺嘌呤(A)数为785个, 占38.69%; 鸟嘌呤(G)数为193, 占9.51%; 胞嘧啶(C)数为228, 占11.24%; 胸腺嘧啶(T)数为823, 占40.56%。
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