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作物学报 ›› 2007, Vol. 33 ›› Issue (10): 1724-1728.

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甘薯番茄红素β-环化酶基因的克隆与转化烟草的研究

陈选阳1,2 , 袁照年2 , 张招娟2 , 郑金贵1,*

  

  1. 1 福建农林大学农产品品质研究所;2 福建农林大学作物学院,福建福州350002
  • 收稿日期:2006-08-30 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-10-12 网络出版日期:2007-10-12
  • 通讯作者: 郑金贵

Cloning of lyc-b Gene from Sweetpotato (Ipomoea batatas L.) and Transferring the Gene into Tobacco

CHEN Xuan-Yang 1,2 , YUAN Zhao-Nian 2, ZHANG Zhao-Jian 2, ZHENG Jin-Gui 1,*   

  1. 1 Institute of Agricultural Product Quality of Fujian Agricultural and Forestry University, 2 College of Crop Science of Fujian Agricultural and Forestry University, Fuzhou 350002, Fujiang, China)
  • Received:2006-08-30 Revised:1900-01-01 Published:2007-10-12 Published online:2007-10-12
  • Contact: ZHENG Jin-Gui

摘要:

番茄红素β-环化酶(LYC-B)催化番茄红素形成β-胡萝卜素,是β-胡萝卜素生物合成的关键酶之一。从甘薯块根总RNA逆转录的cDNA中扩增出lyc-b的保守序列后,用cDNA末端快速扩增方法(RACE)获得了该基因全长cDNA,共1 844 bp,开放阅读框1 503 bp,编码501个氨基酸。构建了lyc-b植物表达载体p23-lyc-b,通过农杆菌介导法转化烟草,经PCR及Southern杂交表明该基因已整合到烟草的基因组中。

关键词: 甘薯, lyc-b, 基因克隆, 载体构建, 转化

Abstract:

Lycopene β-cyclase, which catalyzes linear lycopene to cycle and become β-carotene, is one of key enzymes in the β-carotene biosynthesis pathway. Total RNA was purified from sweetpotato tuberous roots and was reverse-transcripted into cDNA, and the consensus sequence of the gene for lycopene β-cyclase (lyc-b) was amplified from the cDNA, then total cDNA sequence of lyc-b was obtained by the ways of Rapid Amplification of cDNA End (RACE). Sequence analysis showed that the complete sequence of lyc-b consists of 1 844 bp, which has an Open Reading Frame of 1 503 bp and encodes a protein of 501 amino acids. The gene was constructed into plant express vector p23-lyc-b,and was transferred into tobacco by Agrobacterium-mediated method. The results of PCR and Southern blot showed that the gene was integrated into tobacco genome.

Key words: Sweetpotato (Ipomoea batatas L.), Lycopeneβ-cyclase, Gene clone, Vector construction, Transformation

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