欢迎访问作物学报，今天是
作物学报

作物学报 ›› 2008, Vol. 34 ›› Issue (09): 1581-1587.doi: 10.3724/SP.J.1006.2008.01581

• 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学 • 上一篇    下一篇

野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及功能分析

樊金萍1,2;柏锡2;李勇2;纪巍2;王希2;才华2;朱延明2,*   

  1. 1 东北农业大学园艺学院; 2 东北农业大学生命科学院, 黑龙江哈尔滨150030
  • 收稿日期:2007-08-17 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-09-12 网络出版日期:2008-09-12
  • 通讯作者: 朱延明

Cloning and Function Analysis of Gene SAMS from Glycine soja

FAN Jin-Ping12,BAI Xi2,LI Yong2,JI Wei2,WANG Xi2,CAI Hua2,ZHU Yan-Ming2*   

  1. 1 College of Horticulture, Northeast Agricultural University; 2 College of Life Sciences, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, Heilong-jiang, China
  • Received:2007-08-17 Revised:1900-01-01 Published:2008-09-12 Published online:2008-09-12
  • Contact: ZHU Yan-Ming

PDF

2683

被引次数

43

摘要： 干旱、盐碱和低温等非生物逆境是危害作物诸多因素中最为严重的自然灾害, 它可以使作物减产, 甚至死亡。目前通过生物技术手段获得可利用的抗性基因是提高植物抗性的重要途径。东北野生大豆具有丰富的基因资源, 是基因克隆的理想材料。从低温(4℃)、干旱(30%PEG)及盐胁迫(200 mmol L-1NaCl)处理的东北野生大豆幼苗叶片中提取总RNA, 经反转录合成cDNA第一链, 并以此链为模板, 从已构建的盐胁迫全长cDNA文库和东北野生大豆盐胁迫EST数据库中筛选出与渗透胁迫直接相关的EST序列, 根据该序列设计一对PCR引物扩增S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因的全长序列, 经Blast比较分析, 确定所获得的SAMS基因全长序列。构建以pBI121为基础的CaMV35S启动子调控的植物表达载体; 利用农杆菌介导法将其导入烟草, 获得了180株转基因烟草, 并进行了低温、干旱和盐胁迫处理, 通过测定在不同胁迫处理下的生理指标, 分析了基因的功能。野生大豆的SAMS基因在烟草中的超量表达提高了转基因烟草的抗低温、干旱和耐盐能力。

关键词: 野生大豆, SAM合成酶, 基因克隆, 功能分析

Abstract: Drought, salinity, and low temperature are the most severe natural disaster of many abiological adversities. They can make crop yield reduction, even to death. At present, biotechnology is an important way for crops to improve plant resistance. Glycine soja carrying tolerant genes in northeast of China was used as a material for cloning. Total RNA was extracted from the leaf, and the first strand of cDNA was synthesized with reverse transcription under low temperature (4℃), drought (30%PEG), and salinity (200 mmol L-1 NaCl). S-adenosylmethionine synthetase gene (SAMS gene) was amplified by PCR with the first strand cDNA as template and a pair of primer based on constructed the cDNA library and ESTs sequence under salinity condition. Full-length SAMS gene sequence was obtained by Blast comparison. A expression vector based on pBI121 with CaMV35S promoter was constructed, and 180 transgenic tobacco plants transformed by Agrobacterium tumefaciens were obtained. Transgenic plants resistances to drought, salinity and low temperature were investigated. The gene function was analyzed via measuring the physiological stress indicators under different osmotic pressures. The results showed SAMS gene can improve tobacco resistance to lower temperature, drought, and salinity.

Key words: Glycine soja, S-adenosylmethionine synthetase, Gene clone, Function analysis

[1] 左同鸿, 张贺翠, 曾静, 朱利泉. 甘蓝自交不亲和相关基因BoPUB3L的克隆与表达分析[J]. 作物学报, 2026, 52(6): 1698-1710.
[2] 宋裕祯, Bheel Chander Kumar, 王跃, 张颖星, 郭娟, Khound Rituraj, Santra Dipak Kumar, 曹晓宁, 王瑞云. 糜子AP2亚家族全基因组鉴定及PmAP2-1和PmAP2-9耐盐功能分析[J]. 作物学报, 2026, 52(4): 1127-1139.
[3] 汪玲, 胡好, 宋家凤, 程洁蓝, 陈颖, 郑婷婷, 吕钊彦, 朱晓彪, 侯华兰. 马铃薯UDP-糖基转移酶基因StUGT52的克隆及功能验证[J]. 作物学报, 2026, 52(3): 665-676.
[4] 张晴, 杨昱, 郭茜, 岳霈尧, 殷丛丛, 牛景萍, 赵晋忠, 杜维俊, 岳爱琴. 大豆GmARA6a的克隆及响应盐胁迫的功能分析[J]. 作物学报, 2026, 52(2): 480-493.
[5] 余开航, 周洪斌, 罗亮扎, 王玫郦, 姜瑞梅, 董陈文华, 李仕金, 毛孝强, 陈升位. 大麦亮氨酸富集重复型类受体激酶基因HvLRR-RLK-510的克隆和表达分析[J]. 作物学报, 2026, 52(2): 421-432.
[6] 薛晓菲, 戴云静, 李熙林, 丁艳艳, 王翔, 雷长英, 韩焕勇, 贺道华. 陆地棉杜松烯合酶基因GhCDN10的特征及其在棉酚合成中功能分析[J]. 作物学报, 2025, 51(8): 2060-2076.
[7] 王林, 陈晓雨, 张文梦龙, 汪思琦, 程冰云, 程靖秋, 潘锐, 张文英. 大麦HvMYB2分子特性及响应干旱胁迫的功能分析[J]. 作物学报, 2025, 51(4): 873-887.
[8] 张正康, 苏延红, 阮孙美, 张敏, 张攀, 张慧, 曾千春, 罗琼. 疣粒野生稻中OgXa13的克隆和功能研究[J]. 作物学报, 2025, 51(2): 334-346.
[9] 王玉娇, 王永乐, 添长久, 郁春旺, 吕佳斌, 朱加保. 薏苡VQ4基因的克隆及耐盐性初步分析[J]. 作物学报, 2025, 51(12): 3198-3210.
[10] 张顺杰, 吴维泰, 冉禧玥, 赵梓含, 韩永辉, 吴正丹, 张凯. 甘薯β淀粉酶基因IbBAM48829的功能解析[J]. 作物学报, 2025, 51(11): 3096-3104.
[11] 李旭娟, 李纯佳, 田春艳, 孔春艳, 徐超华, 刘新龙. 甘蔗硝酸盐转运蛋白1/肽转运蛋白家族6.4基因(ScNPF6.4)克隆及其调控分蘖功能分析[J]. 作物学报, 2024, 50(8): 2131-2142.
[12] 李闻娟, 王利民, 齐燕妮, 赵玮, 谢亚萍, 党照, 赵丽蓉, 李雯, 徐晨梦, 王琰, 张建平. 亚麻LuWRI1a在旱盐胁迫响应中的功能分析[J]. 作物学报, 2024, 50(7): 1750-1761.
[13] 李海芬, 鲁清, 刘浩, 温世杰, 王润风, 黄璐, 陈小平, 洪彦彬, 梁炫强. 花生赤霉素3-β-双加氧酶(AhGA3ox)基因家族的全基因组鉴定及表达分析[J]. 作物学报, 2024, 50(4): 932-943.
[14] 张宝华, 刘佳静, 田晓, 田旭钊, 董阔, 武郁洁, 肖凯, 李小娟. 小麦TaSPX1基因的克隆、表达及耐低氮逆境的功能研究[J]. 作物学报, 2024, 50(3): 576-589.
[15] 李宛鸿, 胡冰霜, 孙晓丽, 才晓溪, 孙明哲. 过表达野生大豆耐盐碱基因GsGSTU13提高了水稻苗期耐盐碱性[J]. 作物学报, 2024, 50(10): 2458-2467.
Viewed
Full text


Abstract

Cited
  Shared   
  Discussed   
No Suggested Reading articles found!
京ICP备15008789号-2